Разработка метода определения уровней экспрессии генов биотрансформации ксенобиотиков в коже пациентов

Лечение атопического дерматита и экземы основано на эпизодическом применении мест-
ных глюкокортикоидов в комбинации со смягчающими и увлажняющими средствами для бы-
строго купирования симптомов заболевания. Успех применения наружных лекарственных
средств для местного лечения при атопическом дерматите и экземе во многом определяется
уровнем активности системы трансформации ксенобиотиков в коже пациентов, которая мо-
жет обуславливать фармакокинетическую невосприимчивость, за счет низкой концентрации
активного вещества в ткани или за счет резистентности клеток кожи. Изучение индивидуаль-
ных особенностей уровней экспрессии некоторых генов, вовлеченных в процесс биотранс-
формации ксенобиотиков, может служить маркером чувствительности клеток кожи к лекар-
ственным средствам для местного лечения, так как уровень экспрессии гена дает представле-
ние о возможном количестве белкового продукта данного гена, который принимает участие
в метаболизме лекарственных средств в клетках кожи. В ходе проведения исследований был
разработан метод определения уровней экспрессии генов биотрансформации ксенобиоти-
ков (UGT1A7, HMOX2, BLVRA, CCL13, APOBR, ABCC2, GSTP1) в соскобах глубоких слоев кожи па-
циентов на основе применения ПЦР в режиме реального времени. Для каждого из генов были
подобраны и апробированы пара специфических праймеров и зонд, а также программа ам-
плификации. В результате электрофоретического анализа фрагментов ДНК, амплифицирован-
ных в соответствии с разработанным методом, было выявлено присутствие четких полос на
уровне детекции специфических фрагментов ДНК во всех анализируемых образцах. Высокие
показатели аналитической специфичности были установлены для разработанного метода с
применением сиквенс-анализа. Разработанный метод обладает высокими аналитическими
характеристиками и позволяет проводить определение уровней экспрессии генов биотранс-
формации ксенобиотиков в соскобах глубоких слоев кожи пациентов.