Разработка молекулярно- генетического метода идентификации микрофлоры в соскобах кожи

Введение. Для изучения влияния дерматофитов, дрожжей, малассейзий на течение ато-
пического дерматита и экземы, установления возможной ассоциации между клиническими
характеристиками заболеваний и составом микрофлоры кожных покровов пациентов необ-
ходимо разработать точный и быстрый метод идентификации данных микроорганизмов.
Цель. Разработать метод выявления ДНК дерматофитов, дрожжей, малассейзий в соскобах
кожи с использованием метода ПЦР в режиме реального времени.
Материалы и методы. В группу исследования были включены 86 пациентов, из них 64 – с ато-
пическим дерматитом (L20.0–L20.9); 22 – с экземой (L30.0–L30.9). В контрольную группу были
включены 20 практически здоровых лиц. В качестве биологического материала использова-
ли соскобы поверхностного эпителия с пораженных участков кожи пациентов с атопическим
дерматитом и экземой, у пациентов контрольной группы соскобы брали на локтевых сгибах.
Исследование проводили с применением методов ПЦР в режиме реального времени, класси-
ческой ПЦР с электрофоретической детекцией и сиквенс-анализа.
Результаты и обсуждение. Для проведения исследований по молекулярно-генетической
идентификации микробного пейзажа пораженных участков кожи пациентов с атопическим
дерматитом и экземой оптимальным признано использование набора реагентов на маг-
нитных частицах, которое показало результаты, сопоставимые с референсным методом.
На основании подбора специфических пар праймеров, зондов, оптимизации состава ам-
плификационной смеси и программ амплификации разработан метод, позволяющий прово-
дить выявление ДНК Candida albicans, Candida glabrata, Candida parapsilosis, Epidermophyton
fl occosum, Malassezia furfur, Malassezia restricta, Malassezia оbtusa, Malassezia globosa, Malassezia
sympodialis, Malassezia pachydermatis, Thrichophyton interdigitale в соскобах кожи.
Заключение. Применение разработанного метода позволит объективно оценивать структуру
микробного пейзажа в очагах поражений у пациентов с атопическим дерматитом и экземой.